活细胞工作站

天天见闻 天天见闻 2022-03-08 科技 阅读: 723
摘要: 活细胞工作站可实现在细胞水平上的定性和定量分析、活细胞图像处理、活细胞动态示踪。其他公司也将活细胞成像与高分辨率有机的结合在一起。在低能量的情况下就可以激发,而这样做对活细胞来说要温和得多。也是可以进行活细胞应用的显微镜。法,将对活细胞内部的功能蛋白质进行更好的研究。地自动记录活细胞的生长过程。光细胞动态研究,确保最佳的活细胞成像结果。活性与获得完美活细胞图像的和谐统一。

(1)设备型号及规格日本 OLYMPUS IX81-ZDC 设备功能简介 活细胞工作站可实现在细胞水平上的定性和定量分析、活细胞图像处理、活细胞动态示踪。 在分子水平,可做到基因定位定量表达的动态分析、蛋白质合成降解运输和相互作用的动态 研究、细胞骨架的代谢动力学测定和细胞周期各时相的动态观察等。 主要应用 用于观察长时间细胞培养图像;包括高敏感度成像系统,保证最小的细胞刺激时 间;细胞活性维护系统;自动多荧光、多Z 轴图像获取;支持多孔位,多位置染 色标本、多孔板和活细胞荧光图像扫描;可观察细胞内荧光基团(CFP/YFP)FRET 产生和作用过程,从而揭示用显微镜形态学揭示分子水平分子间、分子内的作用 关系;可以进行定量离子测定等研究,同时也支持常规荧光染料的观察,和快速 荧光切换。 (2)活细胞成像技术 加拿大McGill 大学成像实验室主任Claire M.Brown 表示,要达到这个研究目的,我们非常 需要一个不损坏细胞的封闭环境、且具有比较理想的成像条件。这一条件尤其对于进行动态、 三维成像的多标记样品来说尤其重要。让人高兴的是,近年来在光学设计、多灵敏检测器、 优选探针和先进软件方面的改善,使得这一切成为可能。

今天的活细胞工作站,不仅仅限于 观察,目前的趋势已经从结构或细胞器的分析,转向了功能的相互影响观察研究。 波动中,这种设备也能控制照明的深度以及传播方向。Nelson 认为,计算机对现在,科学 家可以便利的购买到活组织应用的整合新设备,而不用将系统简单的拼凑在一起。如,Zeiss、 Olympus 和Nikon 公司都提供适用于活细胞的倒置研究型显微镜。这些设备可以手动,也可 以完全自动化。其他公司也将活细胞成像与高分辨率有机的结合在一起。Leica 公司市场部 经理表示:“Leica TCSSP5 宽带激光共聚焦显微镜将活细胞功能成像与单一的结构共聚焦 系统中的最高分辨率结构成像结合在一起,实现了两者的实时结合。”Leica 的全内发射荧 光显微镜(AMTIRF)对分子和膜运输之间的囊泡转运、相互作用成像尤其有用。在照明这些变 量的完全控制,确保了精确的、可重复的成像效果。 Nikon 的TE2000 倒置显微镜系列,也为活细胞成像提供了便利。共聚焦和外荧光成像技术 相结合,同时为观察样品提供帮助。此外,串联显微镜包括降噪器,这种特殊的装置可以吸 收掉光路上的杂光,将信噪比(S/N)提升五倍以上,使荧光影像观察、撷取更为清晰。

微速 摄影成像正逐渐变得重要起来。Olympus 和其他几家公司提供了零点漂移聚焦补偿系统设 备,确保了超时获得的成像效果仍然色彩鲜明。 改善细胞环境 当成像时间增加时,细胞需要更好的环境调控。Okolab 公司为显微镜下的细胞提供的是与 传统培养箱一样的环境。为了评估显微镜培育器的性能,Okolab 公司将新设备与常规的CO2 培养箱进行了比较,测试结果表明,Okolab 显微镜之下的细胞环境与常规培养箱中的湿度、 CO2、温度条件相同。 在实验中,必须保证细胞在照明的条件下也能存活。幸运的是,新探针只需要较少的光就可 以被激发,并且改良的照相机只需要很少量的荧光。成像应用专家菲利说道:“需要的光少, 曝光时间就更短。”产生的光毒性和光漂白作用就轻,细胞没有受到损坏,就能进行更长时 间的成像实验。成像技术在瞬时清晰度性能方面的改善,让研究人员获得了更多的信息。 说起近几年最让人激动的进展,应该是“有更多更好的生物学标记”,尤其是荧 光染料,让科学家标记更准确。改善的探针,灵敏的共聚焦系统,能以非常高的 速度获得多维信息。“探针改良部分来自于激发波长的扩展。例如,较长的波长 在低能量的情况下就可以激发,而这样做对活细胞来说要温和得多。

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Olympus 显微镜是为近红外光设计的。因此,可以在样品内部更深的地方成像。用户也可以从绿色光转换到近红外光,而不需要调整显微镜的焦距。通过改善镜片标准和 涂层技术,Olympus 的显微镜在一个更广范围的波长上具有优秀的颜色校正性 快速的激发变化改善了实验的精确性。采用共区域化研究,并且对细胞的不同部分进行染色,就可以获得一个五彩缤纷的成像效果。激发波长之间的快速转换可 以让不同的探针在相同的瞬间进行成像。 虽然各方面的进展不少,但活细胞成像仍然受到数据处理这一老生常谈问题的困 扰。正如Brown 所说,活细胞成像通常忽略数据的处理,认为成像处理和分析过 程是最费时的方面,这一过程需要受过高度训练的专家。其实,活细胞成像另一 个问题是数据处理,很容易产生30~60G 的文件。因此,许多公司也考虑解决软 件的问题。PerkinElmer 公司的PaulOrange 表示:“我们已经获得了所有这些 高性能的成像设备,但是人们也需要一个用户友好型的软件进行工作,以提供强 大的功能。” Okolab 公司的OKO-Vision 也是可以进行活细胞应用的显微镜。Luca 介绍道:“我 们的软件分成几个模块,这样用户就可以选择自己所需要的那部分,包括基础的 二微微速摄影,多通道或自动样本扫描操作。

我们的目标是让用户不需要程序设 计,软件就能执行准确对焦操作。” 目前,活细胞成像方面的进展仍然在不断涌现。快速的、不断改善的动态分析方 法,将对活细胞内部的功能蛋白质进行更好的研究。成像专家也在进一步推动原 位成像的真实性。人们不仅想去观察一个动物体中的一个细胞工作细胞,并且用显微镜进 行成像,而且也期望看到全貌。你将会看到越来越多的整体动物的成像。对活细 胞成像来说,能同时进行成像,并且区别多重荧光信号将变得越来越重要。最终, 这个领域将进化到活动物成像。当然,要想实现这一过程,从器官、系统水平到 分子水平的生命过程的观察,将需要光学、检测器、探针和软件等各方面的不断 进步。 文章链接:中国制药机械设备网 (3)TE2000 尼康显微镜 【详细说明】 相差是倒置显微镜最常用的观察方法。该方法不要 求标本染色,用于观察活体细胞和微生物最为理想。 相差成像技术提供了带中性背景的明亮、高对比度、高分辨率的图像。 尼康采用了“切趾”相衬的新技术,减少了成像光晕,从而产生对比度优越、色调范围更广的图像。 荧光:在涉及荧光蛋白质这样的活体细胞显微术中, 这种方法不可或缺。 尼康独创的消杂光机构最大限度地消除了背景杂光,从而在动态活细胞成像试验中观察发微弱荧光的标 本时能产生更高信噪比的图像。

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霍夫曼调制相衬(HMC)方法使用尼康的专用物镜和 标镜,它将相们梯度转换为光强度变化,使透明的活 体标本产生生动、具有三维立体感的图像。 HMC成像技术中,标本可以置于塑料培养皿中观察, 弥补了诺马斯基微分干涉相衬技术的不足。 微分干涉相衬(DIC)方法让未经染色的活体细胞和 微生物所观察到的图像具有三维浮雕状的立体感,且 对比度和灵敏度出众。 尼康DIC系统采用塞拿蒙方法,使用该系统时,您只 需转动聚光器顶部的偏振器即可轻松微调图像的对 聚光器上的DIC棱镜与物镜上的DIC 棱镜一一对应, 因此性能得以优化。若将DIC 与落射荧光照明组合使 用,可以对荧光标记结构或蛋质精确定位,在同一标 本里显示细胞形态。 多端口、分层结构设计 TE2000-E:包括观察和左/右侧、前端、底端五个端口。电动功能 TE2000-E作为标准的电动机型提供了全面的电动控制,通过PC 软件进 行控制。 带有高精度的线性编码器和光路切换消震机构,有利于3D图像的捕获。 TE2000-PFS:在TE2000-E机型的基础上增加了红外对焦功能——在添 加试剂或样品延时观察时可以校正焦点的漂移;通过光学补偿特征, 整个标本的任何一个感兴趣的焦平面都可以连续校正;聚焦精度可以 达到物镜焦深的1/3 以下;红外发光二级管探测器波长不干扰荧光观 察的波长,高衬度地再现了单分子的荧光。

通过数码相机可以长时间 地自动记录活细胞的生长过程。 TE2000-U/S机型可以有选择地选配电动附件。 (4)DeltaVision Core 多功能活细胞显微成像工作站 美国API 公司专业提供图像重建(去卷积)显微镜,其产品是“活细胞显微成像的金标准”, 最新推出的DeltaVision Core 多功能活细胞显微成像工作站功能更为强大,专为更长的时间里 看更多的探针和样品而设计。 DeltaVision Core 多功能活细胞成像工作站系统功能极为强大,专为日益复杂困难的成像 需求而设计,系统集成了当今最先进的实时2D 去卷积、3D 扫描、实时Z-Sweep 采集、快速色彩 切换以及工业标准的3D 图像重建法、快速成像、浏览、归档等功能。 先进的“活细胞”成像集成了完整的细胞示踪、自动聚焦、(多)点观察、延时观察以及激 光细胞动态研究,确保最佳的活细胞成像结果。功能强大的softWoRx 软件除包含基本的3D 观察 和分析功能外,还有高级包括FRET,Colocalization 在内的高级应用模块。 DeltaVision Core 全新的构造可以保证在高数据通量的情况下实现图像的快速观察和分析, 为多平行实验提供高度的自动化,以满足更高的成像要求。

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更快地图像获取速度-新一代的控制系统速度更快 更宽的样品移动平台-25 mm 50mm 的移动平台适于观察样品的全景 可提供持续600小时的工作光源 DMS实验室服务器管理图像和数据 可升级–升级选项包括多重波段成像,环境控制,DMS 实验室服务器,独立的softWoRx 工作站,瀑布式电子显微镜照相机等。 去卷积原理 去卷积(逆卷积):提高数字成像对比度和分辨率的计算技术。包含一系列的方法移去或倒 转显微成像中模糊的图像。 去卷积的应用 去卷积经常被描述为共聚焦的替代品,严格意义上来说,去卷积适用与几乎所有的数字荧光 显微图像;共聚焦的图像同样可以去卷积处理。共聚焦和去卷积虽然都是提高显微成像的图像的 质量,但两者实际处理时方法恰恰相反。共聚焦通过小孔把非焦平面的光排除在检测器之外,而 去卷积系统采集所有的信号,然后再进行处理。一般来说,共聚焦比较适合厚的样品如胚胎、和 组织;而宽视场去卷积更适合与低光照成像如活细胞、荧光标记的蛋白和核酸等。 应用 该系统提供一整套综合完整的图像处理方案以满足多种不同的应用,并提供行业瞩目的定量 结果。无论是小样本高分辨率成像、快速活细胞成像、细胞示踪及相互作用、点观察、多样本延 时观察、5 通道成像,还是激光模式FRAP/FRET/FLIP/PA-GFP 动态性研究,DV 系统都可以提供 无与伦比的可定量的高品质成像结果,迅速促进科研的进步。

RNAi研究 蛋白转运及蛋白通道的研究系统特征 1.独特的 双重照明系统 Xe 灯照明,长寿命,可以实现长时间持续稳定照明,以满足活细胞成像需要; 全程消色差光纤传输系统,独特的能量监控系统,有效消除光源波动带来的误差, 确保定量分析的准确性。改进的LED 透射照明,更稳定。特有的FOM 光纤模块可 以便利从Khler 照明模式切换到Critical 照明模式,以适合不同用途。 2.两种采集模式 section标准3D 图像采集,可以输出不同Z 轴信息的图像;Z Sweep 采集, 一次性采集3D 空间上的信息,输出一张2D 3.自动聚焦只需最少的曝光时间就可以获得最佳的聚焦效果,最大限度延长细胞的活性。 该功能可以与点观测、延时观测、细胞示踪结合使用,特别适合长时间的延时观 4.纳米级载物台高精度、高重复性可实现多点观测,无人看守下自动化采集;定义不同细胞 的坐标,可以实现无人看守(多)细胞跟踪。 (5)多面手高内涵活细胞工作站 BDPathway 855 和其它同类型仪器相比,BD Pathway 855 具有如下特点 真正的光学共聚焦:系统配有共聚焦碟片,用户可依据实验情况和成像需求,自由选择使用宽场或共聚焦成像。

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共聚焦不仅能提高图像清晰度,而且能有效降低光毒性和光漂 白性。结合Z 叠加和3 维重组,用户可获得贯穿样本深度的荧光信息及结构细节。 大视野无缝拼接:基于高精度定位(X-Y100nm,Z 50nm)移动物镜扫描,轻松实现 图像蒙太奇功能,在高倍镜下实时完成多重视野的无缝拼接,彻底突破长久以来观察范 围和细节的矛盾,特别适合于研究神经突触生长、血管新生等连续性结构。 活细胞动力学:系统支持多种活细胞成像应用,例如用单或双波长染料的钙动力学。借助内置的自动加样机械臂,可以捕捉药物加入前后连续动态变化,实时观察细胞反应。 系统支持多种类型的孔板和玻片,并允许用户根据需要修改现有应用模板或开发自己特 有应用。实验应用可分为以下四个方面。 荧光强度:钙动力学、有丝分裂指数、细胞活性、细胞毒性、细胞周期、凋亡、线粒体活性(JC-1、TMRE、MitoTracker)、脂肪变性、IkB 变性、氧分子和活性氧簇、整个生 物体成像(果蝇,拟南芥工作细胞,斑马鱼)、组织芯片 荧光分布和共定位:质核转位、DNA损伤(与修复)、有丝分裂缺陷(单极纺锤体)、 凋亡、联会结点定位、荧光原位杂交、3 维细胞成像(干细胞,胰岛)、Transfluor-GPCR 形态学:管形成(血管新生)、神经突外生、微核分析、形态测量分析(微管蛋白)、凋亡(核大小,粒度) 运动和迁移:细胞迁移、趋化性、细胞侵袭 (6)活细胞工作站系统cell^R 跨入21 世纪,对于活细胞和组织的全方位研究成为推动细胞生物学、神经生物学、发育生物学等最活跃 生命学科研究的强大引擎。

奥林巴斯最新活细胞成像系统可以提供自由的多维活细胞图像采集、控制、分 析等强大功能;可以充分保证整个活细胞采集过程中光学、电学、温度、湿度、PH值等多个条件的高度 协调和稳定;并在活细胞拍摄过程中保持高清晰、高反差和高速度的成像效果;充分体现了维持细胞生命 活性与获得完美活细胞图像的和谐统一。 延时序列成像(Time-lapse) 时间序列成像主要用于自动采集活细胞随时间变化的图像。适用于拍摄细胞生长、新陈代谢、 神经传递、信号传导等细胞生理和动态信号的观察,拍摄的间隔时间从毫秒级到小时甚至于 数天。Olympus 新活细胞系统具备方便灵活的互动式图形化界面,可以实现从快速拍摄到长 时间延时成像实验的高细胞活性和高信噪比成像,并行控制方式实现多硬件快速协调的工作。 多通道荧光图像采集(Multi-Color) 对多标的样品,通过获取多通道荧光图像,可以清楚地区别标记了不同荧光的亚细胞结构。 同延时序列成像实验一起,可以记录到多色荧光信号的动态变化过程。MT-20 提供快速切换 波长的激发光源,实现高速多色成像。 多维图像获取(Multi-Dimensions) 自动采集样本空间多维影像,适用于形态学空间定位研究、空间三维测量等。

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配合超高精度 高速度的压电Z 轴,可以记录快速的空间动态变化,如细胞空间生长变化和离子空间分布变 化等。通过适配其它电动部件,可以一次实验完成多处理、多位置、多时间点的全部采集, 极大降低了人工操作的复杂性,保证了实验条件的一致。 选配转盘式扫描共聚焦DSU系统,可以搭配成理想的电动3D 层叠图像分析系统,实现自由 选择荧光标记的高光通量共聚焦系统。 离子比例图像获取(Ratio) 离子比例测定系统通过比较荧光染料在不同激发或发射波段下的不同变化。可以有效地屏蔽 系统造成的背景影响,增加信号采集敏感性,并且测量结果不受染料浓度和荧光漂白影响。 更重要的是可以使用比例离子测定的方法进行离子定量研究。该类实验可以鉴定活细胞中钙 离子的空间分布差异、测量胞内PH值和监控离子浓度随时间的变化等。Olympus 新的活细胞 系统使用快速单色仪光源,高速采集Ratio 图像,可进行图像背景和荧光光源的校正,并实时 显示动态变化曲线。 全内反射荧光图像获取(TIRFM) TIRFM系统将全反射荧光技术与传统的落射荧光技术、明场透射照明技术有效地结合在一起,能消除来自 细胞体的荧光,提高了荧光图像的信噪比,被广泛应用在生物和化学领域,用来观察100nm深度附近的细 胞膜表面甚至是单分子荧光。

该套全新的TIRFM系统使用多接口接入模式,自动控制临界角设定,各激发波长独立引入、独立调整,可 以安装4 个激光器,选配多达8 个谱线,能够同时获取四色TIRF 荧光成像。配合MT-20 光源,在TIRFM 成像和常规宽场荧光观察之间切换非常简单。 (7)多维活细胞工作站LCS-IX81 功能/应用范围:应用于活细胞的长时间观察,分子代谢研究PET,探针SPECT,荧光成像FRI,荧光介导层析成像FMT,生 物发光成像(基因表达、细胞追踪成像),动态细胞分析技术,如FRAP,FRET,Ca++测量等等。 主要附件: 1.显微镜 2.光源,高速荧光激发光切换控制和电动光闸 3.电动载物台 4.焦点零漂移系统 5.环境控制 高灵敏度冷CCD7.图象分析器 主要技术指标: 1.UIS2 光学系统具有高透光率、高信噪比和全光谱色差校正功能。 2.荧光光源:汞灯\氙灯,金属卤素灯 3.活细胞专用培养系统 技术特色: 肿瘤细胞信号传导研究 (8)设备名称:高速高效活细胞工作站 简介: UltraviewVox 激光共聚焦活细胞工作站是由PE 公司研发的转盘式激光共聚焦成像系统。该 系统应用最新的转盘式扫描技术和细胞图像分析处理软件技术,在统一的软件操作平台上同 时完成细胞图像的采集、观察、测量、动态示踪、量化参数列表/趋势模式分析和多通道高 品质图像的输出及视频动画电影制作等。

该设备可实现在细胞水平上的定性和定量分析、活 细胞图像处理、活细胞动态示踪。在分子水平,可做到基因定位定量表达的动态分析、蛋白 质合成降解运输和相互作用的动态研究、细胞骨架的代谢动力学测定和细胞周期各时相的动 态观察等。活细胞动态观察、长时间采图、电影纪录;细胞骨架(细胞3D 结构重建、及空 间定位)、蛋白质合成和胞内信号传导等研究;荧光共振能量转移FRET;荧光共定位;荧 光追踪;荧光图像处理、测量。 作为国内率先引进的高端仪器其中, 在仪器运行时间、技 术水平、科研成果等方面均居国内首位,院内外多个课题组应用该仪器取得了很好的实验结 %CF%D4%CE%A2%B3%C9%CF%F1%C6%BD%CC%A8&Smallclassname=%D6%F7%D2%AA%C9%E8%B1%B8 (9)蔡司活细胞工作站 特点: 显微镜主机全金属结构,金字塔形主机结构设计,机械温度稳定性高,高稳定性调焦机构设计,保证长时 间观察图像不模糊; IC2S 无限远光学系统,具有轴向和径向双重色差校正,大大提高成像的清晰度和荧光亮度; 荧光光路使用新的高效滤色块,专利的荧光光陷阱技术有效消除杂散光,提高激发效率70%,节省50%的 曝光时间; 通过软件实现了显微镜滤光片自动转换、高速荧光光闸自动开关、培养箱CO2 浓度、温度、湿度的实时精 确控制和监测,保证了仪器的整体化,最优化和稳定性,结合高灵敏度、高分辨率的数码冷CCD 适于活 体快速成像及长时间、多通道连续观察;Axiovison 软件具有强大的数据分析、测量和计算功能。

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